pcr實(shí)驗(yàn)室污染后的處理方法有哪些呢?

發(fā)布日期:
2021-08-27

? ? ? ? ?pcr實(shí)驗(yàn)室污染后需要如何處理呢,如何才能更好、更全的避免這樣的事情發(fā)生呢?回答這樣的問(wèn)題需要專(zhuān)業(yè)的pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)公司用專(zhuān)業(yè)的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)我們指導(dǎo)以及一些備用的方法,針對(duì)這一情況,深圳賽諾給我們兩點(diǎn)關(guān)于pcr實(shí)驗(yàn)室污染的處理方法以及pcr實(shí)驗(yàn)室操作需要注意的事項(xiàng)的總結(jié):

解決PCR實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)被污染的方法??

? ? ? ? ?第一:修飾:標(biāo)記遺傳物質(zhì),阻止聚合酶與核酸的結(jié)合,從而抑制DNA擴(kuò)散(效果相對(duì)較好)。

? ? ? ? ?第二:酒精擦拭:將核酸沉淀,擦拭后保證污染表面污染得到一定程度的緩解(簡(jiǎn)單、方便、成本低)。??

? ? ? ? ?第三:紫外照射:PCR產(chǎn)物中嘧啶堿基會(huì)形成二聚體,延伸終止(方便、范圍廣、成本低)。

? ? ? ? ?第四:酶解酶可將長(zhǎng)鏈的核酸分子降解成小片段(速度快、效果效果相對(duì)相對(duì)較好)。??

? ? ? ? ?第五:高壓變性:高壓可以將核酸降解成20-30bp的小片段(徹底、成本低)。??

PCR實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)??

? ? ? ? ?盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽(yáng)性反應(yīng)的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真,在樣品的收集、抽提和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意:

? ? ? ? ?1、盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器最容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染,最好使用可替換或高壓處理的加樣器。如沒(méi)有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過(guò)程中加樣器應(yīng)該專(zhuān)用,不能交叉使用,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區(qū);

? ? ? ? ?2、避免反應(yīng)液飛濺,打開(kāi)反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況,開(kāi)蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上,應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面;??

? ? ? ? ?3、戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套;??

? ? ? ? ?4、最后加入反應(yīng)模板,加入后蓋緊反應(yīng)管;

? ? ? ? ?5、使用一次性吸頭,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染;

? ? ? ? ?6、操作多份樣品時(shí),制備反應(yīng)混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應(yīng)的精確度;

? ? ? ? ?7、操作時(shí)設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照,即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性;??

? ? ? ? ?8、重復(fù)實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證結(jié)果,慎下結(jié)論。??


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